下面是小编为大家整理的初级检验技师临床免疫学和免疫检验第二十一章临床免疫检验质量保证（完整文档）,供大家参考。
其次十一章
临床免疫检验的质量保证
第一节
概述
一、 定义
1.质量保证（QA）：为一产品或服务满意特定的质量要求供应充分可信性所要求的有方案的和系统的措施。
2.室内质量掌握（IQC）：由试验室工作人员实行肯定的方法和步骤，连续评价本试验室工作的牢靠性程度，旨在监测和掌握本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的全都性，并确定当批的测定结果是否牢靠，可否发出检验报告。
3.室间质量评价（EQA）：实行肯定的方法，连续、客观地评价试验室测定结果与靶值的差异，发觉误差并校正结果，使各试验室之间的结果具有可比性。这是对试验室操作和试验方法的回顾性评价，而不是用来打算实时的测定结果的可接受性。当 EQA 用来为试验室执业许可或试验室认证的目的而评价试验室操作时，常描述为试验室力量验证（PT）。
4.精确
度：
待测物的测定值与其真值的全都性程度。精确
度不以数值表示，通常以不精确
度来间接衡量。对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不精确
度。
5.偏倚：待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。偏倚又分批内偏倚和批间偏倚， 批内偏倚反映的是系统误差，如校准不准、非特异显色等。
批间偏倚问题要更大，如试剂或校准物变质所致的误差。
6.精密度：在肯定条件下所获得的独立的测定结果之间的全都性程度。以不精密度来间接表示。测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（SD）和（或）变异系数（CV）具体表示。SD 或 CV 越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。精确
度好的试验，其精密度不肯定好；精确
度差的试验，其精密度则不肯定差；反之亦然。
7.重复性条件：是指在短的间隔时间内，在同一试验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设施，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。
8.批：在相同条件下所获得的一组测定。
9.均值：一组测定值中全部值的平均值，亦称均数。均值为计算值，在实际测定数据中可能会消失该数值，也可能没有。
10.标准差：为表示一组测定数据的分布状况，即离散度，可用标准差来表示。
11.变异系数：将标准差以其均数的百分比来表示，即为变异系数。
12.正态分布：当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，当测定数据足够多时，如以横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相应测定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中为全部测定值的均值，左右对称的“钟形”曲线，亦即正态分布，又称高斯分布。
二、 试验方法诊断效率评价
1.诊断 敏感性：是指将 实际患病者正确地推断为阳性（真阳性）的百分率。本指标可用于评价测定方法的临床应用价值，抱负测定方法的诊断敏感性应为 100%。
2.诊断 特异性：是指将 实际无病者正确地推断为阴性（真阴性）的百分率。本指标是用于评价测定方法的临床应用价值，抱负测定方法的诊断特异性应为 100%。
3.诊断效率：是指能精确
区分患者和非患者的力量。抱负测定方法的诊断效率应为 100%。
4.阳性猜测值（PPV）：是指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的比率，抱负测定方法的阳性猜测值应为 100%，亦即没有假阳性。
5.阴性猜测值（NPV）：是指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性的比率，抱负测定方法的阴性猜测值应为 100%，亦即没有假阴性。
其次节
免疫检验的质量掌握原则
一、 标本的正确收集及处理
用于免疫检验的临床标本最为常用的是 血清（浆）。对用于激素和治疗药物测定的血清标本，要留意收集时间甚至体位对测定结果的影响。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等检测的血清标本无此影响，但可能存在干扰因素。
（一）
内源性干扰因素
包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠 Ig 抗体、交叉反应物质等。
1. 类风湿因子（ RF ）
为避开 RF 的干扰，需实行：
（1）转变标记抗体。
（2）
标本中 F RF 用变性 G IgG 预先封闭：将经热变性（63℃，10 分钟）的兔、羊等的 IgG 加入到标本稀释液中，或是将该变性 IgG 连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后加入临床血清标本，反应后，再吸出标本进行检测。此外，在测定特异 IgM 时，也可使用抗人 IgG 去除临床标本中 RF 和 IgG。
（3）测定 抗原时，可在标本中加入可使 RF 降解的还原剂如 2 2- - 巯基乙醇。2-巯基乙醇等还原剂可使抗体内的巯基裂解，因而可以去除 RF 的干扰，但只适用于抗原测定。
2. 补体 由补体引起的干扰可通过下述方法避开：
（1）对临床血清标本 加热灭活补体。
（2）包被或标记 二抗使用特异的 鸡抗体。
3. 异嗜性抗体 人类血清中含有抗啮齿类动物（如鼠等）的 Ig 的抗体，即自然 异嗜性抗体。异嗜性抗体可通过交联固相和标记的单抗或多抗而消失假阳性反应。
（二）外源性干扰因素
包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、反复冻融和标本凝固不全等。
二、 标准化操作及流程
在免疫测定中，操作步骤对测定结果会产生影响，测定的 精密度是组成测定各步骤的变异和的平方根。改善测定精密度的措施必需首先着重在最不精密的步骤上，如加样、温育时间等。制定“标准操作程序”（SOP），且必需严格按相应的 SOP 进行操作，除非经实际工作证明正在使用的 SOP 中有不适当之处时，才可对 SOP 按肯定程序进行修改。
三、 标准品和质控品的应用
（一）标准品和质控品的分类
1. 标准品 即含量确定的处于肯定基质中的特性明确的物质，这种物质通常是 纯品，可分为第一、其次和第三 3 个等级。
一级标准品数量有限，可使用 10～20 年， 其为冻干品，内含载体蛋白。
通常国际标准品（ IS ）为一级标准品。
我国标准品则为二级标准，可溯源至一级标准，二级标准可用来 维持校准。
三级标准品则通过与二级标准的比对而来，为通常使用的 商品校准品。
2. 质控品 是含量已知的处于与实际标本相同的基质中的特性明确的物质，这种物质通常与其他 杂质混和在一起，依据其用途可分为室内质控品、室间质评样本和质控血清盘 3 类。
（二）标准品和质控品的基本条件
1.标准品的基本条件
（1）标准品的基质通常为含蛋白的缓冲溶液，对测定结果无明显影响。
（2）对标准品的浓度一般无特别要求，在方法的测定范围内即可。
（3）保持稳定性，在肯定时间内，在规定的保存条件下应有良好的稳定性。
（4）无已知的传染危急性，对已知的经血液传播的病原体如 HIV、HCV 和 HBV 等必需作灭活处理。
（5）靶值或预期结果已定。
2.质控品的基本条件
（1）质控品的基质则应尽可能与临床常规试验中的待测标本全都。
（2）室内质控品则要求其所含待测物的浓度接近试验或临床打算性水平。
（3）良好的稳定性。
（4）无已知的传染危急性，对已知的经血液传播的病原体如 HIV、HCV 和 HBV 等必需作灭活处理。
（5）对于质控品，可单批大量获得。
（三）标准品和质控品的定值方法
打算性方法是指具有高精密度及没有系统偏差的参考方法。当没有打算性方法可使用时，则可确定一个参考方法。这种参考方法应有低测下限、不受非特异干扰及不与相关的化合物发生交叉反应，同时还应当简单得到。
（四）标准品和质控品的单位
目前可得到的国际标准品中特定分析物的浓度一般以 L IU/L 表示，而已经很明确的物质如类固醇和甲状腺激素，则应以物质浓度 （ mol/L ）表示。
（五）标准品值的溯源
从一级标准的值传递到最终试验所使用的校准物的过程通常由几个校准步骤组成，包括标准品和测定方法、缓冲液及其基质、稀释的掌握、最终结果的统计学评价和质量掌握等。当建立一个测定方法时，一级标准品的值要传递至二级、三级和（或）校准品，使得所建立的方法的测定值可溯源至一级标准品。
（六）与免疫测定标准品和质控品有关的组织机构
在国内免疫诊断试剂的审批由我国药品监督管理局（SDA）负责。卫生部临床检验中心也正在着手临床免疫检验标准化方面的工作。
试验室的环境、设施和设施：作为一个临床试验室，首先应有充分的空间、良好的照明和空调设施，这是保证检验人员做好工作的前提。试验室仪器设施应保养良好。
第三节
质量保证、室内质控和室间质评之间的关系
临床试验室免疫检验步骤基本上可分为标本收集、试验室测定过程和结果报告及其解释等。
IQC 仅掩盖上述各步中的测定分析步骤；
EQA 则除了监测测定分析步骤外，还包括一个较大范围的试验室活动，诸如在标本接收中样本处理的牢靠性，以及测定结果的报告和解释。
第四节
常用免疫检验的质量掌握
一、 免疫检验质量掌握中常用统计学方法的选择
统计学质量掌握就是使用室内质控物与临床常规标本同时检测，然后依据室内质控物的测定结果，采纳统计学的原理方法推断所进行的临床常规标本测定是否在控的一种质量掌握措施。
（一）统计学质控的特点：临床免疫检验产生的检验误差有两类，一是系统误差，一是随机误差。
统计学质控的 功能就是发觉误差的产生及分析误差产生的缘由，实行措施予以避开。
（二）基线测定：试验室在开展室内质控前，首先要进行试验变异的基线测定，亦即使用质控物确定试验在最佳条件和常规条件下的变异。
1.最佳条件下的变异（OCV）：是指在仪器、试剂和试验操作者等可能影响试验结果的因素均处于 最佳时，连续测定 同一浓度同一批号质控物 0 20 批次以上，即可得到一组质控数据，经计算可得到其均值（`X）、标准差（s）和变异系数（CV），此 CV 即为 OCV。
2.常规条件下的变异（RCV）：是指在仪器、试剂和试验操作者等可能影响试验结果的因素均处于通常的试验室条件下时，连续测定同一浓度同一批号质控物 20 批以上，即可得到一组质控数据，经计算可得到其均值、标准差和变异系数（CV），此批间 CV 即为 RCV。
当 RCV 与 OCV 接近，或小于 2OCV 时，则 RCV 是可以接受的，否则，就需改进常规条件下的操作水平。
通常在免疫检测中 A ELISA 测定的 OCV 应 小于 15%，使用 自动化免疫分析仪的测定 OCV 则应 小于 10%。
基线测定还应包括批内变异的测定及对室内质控物的测定精确
度的评价。测定精确
度在定量测定是指批内和批间测定结果的均值与靶值的差异。在定性测定，则是指接近其测定下限的弱阳性样本批内和批间测定的结果是否为阳性。
（三）临床免疫检测质控图的选择、绘制及质控结果推断
1.Levey-Jennings 质控图方法
IQC 数据是用来掌握实际过程的，因此其表达应清晰和直接，在质控图上纪录结果时，应同时纪录测定的具体状况，如日期、试剂、质控物批号和含量及测定者姓名等。
2.Westgard 多规章质控方法
其主要特点有：①具有 Levey-Jennings 质控图方法的优点，可通过相像的质控图来进行分析；②假失控和假告警概率低；③误差检出力量增加，失控时，对导致失控产生的分析误差的类型有较强的辨别力量，从而有助于实行相应的措施进行改正。
其质控图的模式同 Levey-Jennings 质控图，只不过是在质控测定结果的推断上采纳了多个质控规章。
免疫测定的测定范围通常较大，有的具有数个“临床打算性”水平，因此常有必要在每批测定中包括数个具有不同浓度（如高、中和低浓度）的 IQC 样本，由于免疫测定的标准差通常随浓度的增加而明显变大，使得具不同浓度的 IQC 样本无法在一个 Levey-Jennings 质控图上作图。Z Z 计分质 控图即可用于使用多个质控物进行质控的状况，使得在同一质控图上同时纪录不同质控物的测定结果成为可能。
3.累积和质控方法
累积和质控方法对系统误差有较好的测出力量。
4.“即刻法”质控方法
“即刻法”质控方法的实质是一种统计学方法，即 Grubs 特别值取舍法，只要有 3 个以上的数据即可打算是否有特别值的存在。
二、 定性免疫检验
主要有沉淀试验、凝集试验、荧光免疫试验、化学发光免疫试验和酶免疫试验等，此类测定的质控要点是 测定下限，因此应选择 靶抗原或抗体浓度接近试剂盒或方法的测定下限的质控品进行室内质量掌握，并与临床标本的测定同时进行。
这一点对于使用肉眼判定结果的方法尤为重要。如自身抗体检测的荧光免疫试验，每次测定都应至少带一个已知的弱阳性对比，从而有助于推断临床标本的检测结果是否有效。
有些还须用高浓度质控品进行质控。如酶免疫试验中双抗体夹心模式中的一步法。
对于定性免疫检验来说，阴性质控是必需的。
三、 定量免疫检验
主要有放射免疫试验、酶免疫试验和化学发光免疫试验等，后两者通常需要使用全自动免疫分析仪，由于其对测定结果要求有精确
的量值，因此在测定时须用校准品对仪器进行校准，室内质控则应选择特定试剂盒或方法的测定范围内的高、中和低三种浓度的质控品，以监测对不同浓度标本的测定变化。
四、 半定量免疫检验
主要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，测定结果的推断通常为测定抗体的滴度、效价等。此类测定的质量掌握要点是采纳数个相应滴度或效价的抗体作为室内质控品，同时也需有阴性质控。
第五节
免疫检验室内质量掌握的数据处理
一、 室内质控数据的评价和管理
临床免疫检验常见失控缘由有：①测定操作中的随机误差：如标本和试剂吸取的重复性差、试剂未混匀、洗涤不充分和温育时间及环境条件的全都性不佳等；②仪器的问题：如光路不洁、比色波长不对、管道堵塞等；③试剂的...